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                                  移液器操作指南及常見錯誤分析
                                  來源:室內環境檢測部(網絡轉載) 時間:2019-11-26 瀏覽量:6301

                                  移液槍是實驗操作上不可缺少的工具,對于頂尖高手而言,重要的就是實驗的誤差最小,重復再現性好,那就要注意正確移液槍使用,避免因小失大。

                                  移液六部曲


                                  1、裝吸頭

                                  移液器套柄用力下壓,需要時小幅度旋轉即可。

                                  錯誤操作:

                                  用力敲擊吸頭。此方法會帶來吸頭損壞甚至移液器套柄磨損,從而影響其密封性。

                                  2、量程設定

                                  操作之前請先選擇正確的移液器,移液器可在10~100%量程范圍內操作,但在10%量程處操作對于移液技巧要求高,故推薦在35~100%量程范圍內操作。

                                  量程調節:

                                  當由小量程調節至大量程時,朝所需量程方向連貫旋轉,旋轉到達超過所需量程1/3圈處再回調至所需量程。當由大量程調節至小量程時,直接連貫旋轉至所需量程。

                                  3、潤洗

                                  粘稠液體可以通過吸頭預潤濕的方式來達到精確移液,先吸入樣液,打出, 吸頭內壁會吸附一層液體,使表面吸附達到飽和,然后再吸入樣液,最后打 出液體的體積會很精確。

                                  用同一樣品重復吸液排液二至三次,潤洗為以后每次吸液提供相同的接觸面,保證操作的一致性。

                                  對常溫樣品,吸頭潤洗有助于提高準確性;但是對于高溫或低溫樣品,吸頭潤洗反而降低操作準確性,請使用者特別注意。

                                  4、吸頭浸入角度

                                  吸液時盡量保持垂直狀態,傾斜角度不能超過20°

                                  5、吸頭浸入深度


                                  6、吸頭浸入時間

                                  吸液后在液面中保持一秒鐘再將吸頭平緩移開,這對于大容量移液器或者吸取粘性樣品尤為重要。

                                  7、吸液速度

                                  勻速連貫移液,控制好移液速度,太快會造成噴液,液體或者氣霧沖入移液器內部,污染活塞等部件。

                                  8、排液及吹液

                                  先將活塞按至第一檔排液,略作停頓后按至第二檔進行吹液。

                                  排液四種方式:

                                  9、手溫

                                  移液器不宜長時間握在手里,不用時最好將其掛在支架上或者掛在手上晾一下。


                                  移液槍使用訣竅

                                  1、影響移液槍精度因素

                                  (1)溫度:

                                  室溫低時,手溫較高,使得空氣膨脹,吸入冷溶液時往往發生誤差;

                                  (2)氣密性:

                                  tip和槍體的結合部,以及槍內柱體之間的長期磨損,造成誤差;

                                  (3)吸速:

                                  容易造成tip內氣泡產生,而且會污染槍頭;

                                  (4)試劑的揮發:

                                  吸揮發性高的試劑時,蒸汽進入槍頭,內壓增高,結果在壓出液體時,壓力變大,而產生誤差;

                                  解決辦法:

                                  反復抽吸4~5次就可改善。

                                  2、使用注意事項

                                  (1)吸取液體時一定要緩慢平穩地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶液吸入過快而沖入取液器內腐蝕柱塞而造成漏氣;

                                  (2)為獲得較高的精度,吸頭需預先吸取一次樣品溶液,然后再正式移液,因為,吸取血清蛋白質溶液或有機溶劑時,吸頭內壁會殘留一層“液膜”,造成排液量偏小而產生誤差;

                                  (3)濃度和粘度大的液體,會產生誤差,為消除其誤差的補償量,可由試驗確定,補償量可用調節旋鈕改變讀數窗的讀數來進行設定;

                                  (4)可用分析天平稱量所取純水的重量并進行計算的方法,來校正取液器,1mL蒸餾水20℃時重0.9982g;

                                  (5)移液器反復撞擊吸頭來上緊的方法是非常不可取的,長期操作會使內部零件松散而損壞移液器;

                                  (6)移液器未裝吸頭時,切莫移液;

                                  (7)在設置量程時,請注意,旋轉到所需量程,數字清楚顯示在窗中,所設量程在移液器量程范圍內不要將按鈕旋出量程,否則,會卡住機械裝置,損壞移液器。

                                  (8)移液器嚴禁吸取有強揮發性、強腐蝕性的液體(如,濃酸、濃堿、有機物等)。

                                  (9)嚴禁使用移液器吹打混勻液體。

                                  (10)不要用大量程的移液器移取小體積的液體,以免影響準確度。同時,如果需要移取量程范圍以外較大量的液體,請使用移液管進行操作。

                                  移液器的自行檢測

                                  移液器在使用過程中,如果懷疑其精確度,可根據以下提示自行檢測:

                                  懷疑一:移液器是否有漏氣?

                                  1、自行檢測:

                                  目視法檢測:將吸取液體后的移液器垂直靜置15秒,觀察是否有液滴緩慢

                                  的流出。若有流出,說明有漏氣現象。

                                  壓力泵檢測:使用專用的壓力泵,檢測壓力情況,判斷是否漏氣。

                                  2、 可能的原因:

                                  (1)吸頭是否匹配?—— 使用原裝匹配的吸頭

                                  (2)裝配吸頭時有無上緊?

                                  (3)移液器內部氣密性不好?

                                  懷疑二:液體、移液器、吸頭以及環境的溫度差異是否會影響移液器的準確度?

                                  移取液體的溫度與吸頭和移液器的溫度不一致的情況下,液體溫度高于吸頭的,移取的液體體積會偏大,液體溫度低于吸頭的,移取的液體體積會偏小。

                                  懷疑三:液體樣品的密度和水是否有非常明顯的區別?

                                  大部分移液器出廠前的校準是用水作為標準液進行測試的,如果所操作的液體與水的比重有很大差異,所給出的不精確度和不準確度就不能滿足,從而產生誤差。

                                  懷疑四:吸液速度太快,是否會導致移液體積不準確?

                                  吸液速度太快會產生反沖和氣泡,導致移液體積不準確。

                                  ps:移液器長時間不用時建議將刻度調至最大量程,讓彈簧恢復原形,延長移液器的使用壽命。

                                  移液器錯誤操作及處理方法

                                  做為液體操作中最常用的手動可調精密移液器,在使用過程中有些錯誤的操作會給操作本身帶來誤差,有些會造成機器的損壞等,在這里簡單總結如下:

                                  錯誤:裝配吸頭時用移液器反復撞擊吸頭,以上緊;

                                  正確:插入吸頭,左右輕轉旋轉上緊吸頭;

                                  分析:撞擊會造成移液器內部齒輪組合的松動,長期操作會對移液器的精確性造成影響;

                                  錯誤:吸頭與移液器不匹配,影響氣密性;正確選用與移液器匹配、有質量保證的吸頭;

                                  分析:吸頭的不匹配,主要表現為對氣密性的影響。會直接影響移液器的精確性,通常會移液操作會小于設定量;

                                  錯誤:吸液時,移液器傾斜吸液;

                                  正確:垂直吸液;

                                  分析:傾斜的狀態會造成氣壓面的改變。會對移液精度造成影響;

                                  錯誤:吸頭內含有未打出的液體時,移液器平置于桌面;
                                  正確:將移液器垂直掛在移液器支架上;

                                  分析:吸頭內含有未打出液體,移液器平放之后液體有可能會流到移液器體內部,這會對移液器內部組件造成影響,嚴重的回造成損壞,較差污染等情況的發生;

                                  錯誤:用大量程的移液器移取小體積的液體;

                                  正確:移液體積需保證在移液器所提供的量程范圍之內才符合不準確度和不精確度的要求;

                                  分析:因為空氣墊的存在,是造成移液器不準確度的主要原因。移液器的選擇應該是最大量程,最接近目的液體轉移量的選型原則;

                                  錯誤:吸取具有強揮發性的液體;

                                  正確:不建議用普通移液器做強揮發型液體轉移;

                                  分析:如果一定要移取強揮發性的液體,應該在移液結束后立刻拆開移液器,讓蒸汽揮發,同時,建議使用外置活塞式移液器;

                                  錯誤:吸液速度和放液速度過快;

                                  正確:慢吸慢放;

                                  分析:快吸對于1mL及以上量程的移液器,很容易造成液體上沖,過快的放液會增加液體的殘留量。


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